近日,中国农业科学院棉花研究所棉花功能基因组创新团队提出了一种“一体化的双组分病毒使用策略”,将双质粒系统的棉花叶皱缩病毒和烟草脆裂病毒改造为单质粒系统,并将其拓展成为一个多功能的一体化植物病毒载体工具盒,为基因功能和基因编辑研究提供了便利。相关研究成果发表在《植物通讯(Plant Communications)》上。
目前,实验室常用的植物病毒载体多为双组分或多组分,其基因组被克隆到不同的质粒中,分别转化农杆菌均匀混合后使用。这种传统的“混菌使用策略”增加了农杆菌操作的工作量,阻碍了其在高通量基因功能验证中的应用。
该研究首次提出了一种“一体化的双组分病毒使用策略”,即将所有病毒组分置于单一质粒中并通过单一T-DNA进行递送,成功将病毒诱导的基因沉默(VIGS)的双组分病毒系统改造为了一体化系统,并表现出与原始双组分病毒系统类似甚至更好的基因沉默效果。同时,该研究创制了一套标准化的植物一体化双组分病毒载体工具盒,可以用于病毒诱导的基因沉默研究、病毒介导的过表达、病毒辅助的瞬时表达和病毒介导的基因组编辑等。该研究结果不仅为病毒载体的简化使用和开发提供了标准化方案,也为高通量病毒递送技术的发展应用提供了技术支撑。
该研究得到河南省自然科学基金等项目的支持。
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